Это продолжение статьи «Штамм бактерий Zoogloea adapt C-92 (часть 1)»

Поскольку предлагаемый штамм получен впервые и не использовался в промышленной технологии, можно сделать вывод о соответствии предлагаемого штамма критериям изобретения «новизна» и «изобретательский уровень».

Пример 1. Получение штамма бактерий Zoogloea adapt C-92. Новый штамм Zoogloea adapt C-92 получают путем выделения из активного ила сточных вод городских канализационных очистных сооружений и последующей селекцией на среде М9, насыщенной ионами меди. Бактерии засевают в среду М9 с добавлением меди в форме CuSO4 в количестве 120 мг/л, инкубируют при 28oC с аэрацией 15 сут, затем пересевают в свежую среду с более высокой концентрацией меди. Ряд пересевов бактерий позволяет отобрать микроорганизмы устойчивые к 290 мг/л меди. Они обладают повышенной устойчивостью к ионам цинка, железа, свинца и кобальта (таблица). Полученные бактерии эффективно сорбируют ионы тяжелых металлов. После инкубирования в средах без меди бактерии сохраняют свои свойства.

Пример 2. Получение биомассы и сорбция ионов меди бактериями Zoogloea adapt C-92 в лабораторных условиях. Биомассу получают выращиванием бактерий в ферментере в виде суспензии на среде М9 с добавлением 1,5% сахара. Температура инкубирования 28oC, pH 7,0, рост происходит в аэробных условиях 24 ч. Полученную биомассу отмывают от среды дистиллированной воды и осаждают центрифугированием в течение 10 мин при 8 тыс. об/мин. Медь добавляют в форме CuSO4, сорбцию проводят при 25oC 1 ч. Остаточную медь определяют по методике Тихомировой Л.П. [5] Было показано, что 1011 бактерии сорбируют 0,56 мг меди в неростовых условиях.

Пример 3. Определение устойчивости бактерии Zoogloea adapt С-92 к ионам меди. Изучение устойчивости бактерий к повышенному содержанию ионов меди проводят на сточной воде из аэротенка с содержанием (мг/л): железо 1,0; свинец 0,012; медь 0,06; фенол 0,05; нефтепродукты 1,0 с добавлением 300 мл/л среды М9 и дополнительной меди в форме CuSO4 в количестве 78 мг/л. В колбу емкостью 0,5 л вносят 0,2 л подготовленной среды и инокулируют ее 0,2 мл бактериальной суспензии. Начальный титр бактерий составляет 2,7105 кое/мл. Культивирование осуществляют при 28oC с аэрацией в течение 5 сут. Концентрация бактерий при этом увеличилась до 5,0106 кое/мл, что составляет 15% от контрольного варианта, культивируемого без внесения добавочной меди.

Пример 4. Изучение динамики развития штамма Zoogloea adapt C-92 в присутствии нефтепродуктов. Для изучения динамики развития штамма на среде М9 в присутствии 5% нефтепродуктов (соляр: керосин: отработанные масла в соотношении 43 5 52) бактерии (3,6104 кое/мл) засевают в среду и инкубируют 5 сут с аэрацией при 28oC. Концентрация бактерий при этом увеличивается до 2,0107 кое/мл, что соответствует росту бактерий на среде М9 в присутствии 0,2% сахара.

Таким образом, получен штамм, обладающий следующими преимуществами по сравнению с известным:

• эффективная сорбция ионов тяжелых металлов в условиях аэротенка;
• способность использования нефтепродуктов в качестве источника углерода;
• простая питательная среда;
• обычное оборудование, применяемое для культивирования аэробных бактерий.

Список литературы.

Venkateswerlu G. Stotzky G. Appl. Microbiol. and Biotechnol. 1989, v. 31, N 5 6, p. 619 625. Патент Российской Федерации RU 201 78114. Штамм бактерий Desulfovidrio Desulfuricans, используемый для очистки промышленных сточных вод от ионов тяжелых металлов. Andreoni V. Finoli C. FEMS Microbiol. Ecol. 1991, v. 85, N 3, p. 183 191. Sabine P. Kuhn. Pfister P.M. Appl. Microbiol. and Biotechnol. 1989, v. 31, p. 613 618. Tихомирова Л. П. Водоснабжение и санитарная техника. 1994, N 11, с. 30. Краткий определитель бактерий Берги Под ред. Дж. Хоулта, М. Мир, 1980.

Формула изобретения.

Штамм бактерий Zoogloea adapt С-92 ВКПМ В-7040, используемый в качестве сорбента ионов тяжелых металлов. Список документов, цитированных в отчете о поиске: 1. Sabine P.Kuhn., Pfister P.M. Appl. Microbiol. and Biotechnol. 1989, v. 31, p. 613 — 618. Заявитель(и): Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»

Автор: Борисова О.Д.; Гусев В.А.; Пугачев В.Г.; Божко Н.А.; Репин В.Е. Патентообладатель: Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор»